分光光度法定量分析的原理是什么
分光光度法定量分析的原理基于朗伯-比尔定律(Lambert-Beer Law),该定律表述如下:
当一束强度为 \\( I \\) 的单色光垂直照射某物质的溶液后,由于一部分光被溶液吸收,导致透射光的强度降至 \\( I\' \\),则溶液的透光率 \\( T \\) 可以表示为:
\\[ T = \\frac{I\'}{I} \\]
其中,\\( I \\) 是入射光的强度,\\( I\' \\) 是透射光的强度。
根据朗伯-比尔定律,溶液的吸光度 \\( A \\) 与溶液的浓度 \\( c \\) 和光程长度 \\( b \\) 的乘积成正比,可以表示为:
\\[ A = \\epsilon bc \\]
其中,\\( \\epsilon \\) 是摩尔吸光系数,与溶液的性质、温度和波长有关。
在分光光度分析中,通常选择一个参比溶液(如蒸馏水或空气),其透射率 \\( T \\) 设为 100%。被测试样的透射率是相对于参比溶液得到的。通过测量样品在不同波长下的透射率,可以绘制出样品的吸收光谱。
在定量分析时,首先确定最大吸收波长,然后在此波长下测定一系列已知浓度的样品溶液的吸光度,制作出吸光度与浓度的工作曲线。对于未知浓度的样品,可以通过测量其吸光度并查表或利用工作曲线来计算其浓度。
总结来说,分光光度法定量分析利用物质对特定波长光的吸收特性,通过测量吸光度与浓度的线性关系来确定样品中物质的浓度
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